重組蛋白表達在治療和應用領域的需求很高,特別是對于生物技術和制藥公司來說,這是一種治療人類疾病的變革性方法。除了工業用途外,學術研究小組也可以依賴重組蛋白進行功能研究和高分辨率結構確定。
百英生物可提供CHOK1和HEK293的哺乳動物細胞表達服務。哺乳動物蛋白表達通常因其能夠產生復雜蛋白和翻譯后修飾(PTM)能力而被青睞,此外還有抗原制備、抗體發現和結構及功能研究。
除此之外,百英生物也有依據大腸桿菌(E. Coli)的原核蛋白表達系統,E. Coli具有快速培養和易于遺傳操作的優點,并且產生多樣化蛋白類型方面有著良好的表現記錄。百英生物的重組蛋白表達平臺,表達的蛋白產品質量高、表達周期快,同時保證性價比,歡迎咨詢!
通過哺乳動物細胞系統技術進行的表達通常始于您所選序列的合成。在構建質粒載體之后,我們將重組載體轉染進CHOK1(中國倉鼠卵巢)細胞或HEK293(人類胚胎腎)細胞中進行蛋白質的表達和純化,并采用嚴格的質量控制措施SDS-PAGE分析,來確認其存在和純度。
通過E. coli進行的表達是一個多步驟的過程,它始于設計并構建一個攜帶所需蛋白質基因序列的質粒。此后,該質粒被轉化入目標宿主工程菌中,然后在受控條件下培養以促進細菌生長并通過誘導劑誘導蛋白表達。達到最佳表達水平后,細菌被裂解以釋放蛋白質,然后使用包括親和層析或離子交換在內的等多種純化方法進行純化。
通過哺乳動物細胞進行的表達是臨床使用的重組蛋白生產系統的首選,數百個生物制藥候選產品正在臨床開發中。
| Service Step | 服務詳情 | 周期 | 交付物 |
|---|---|---|---|
| 基因合成和亞克隆 |
|
2-3周 |
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| 100ml小量表達 |
|
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| 大規模表達純化(1L-100L) |
|
2-3周 |
|
R: Reducing condition;
N-R: Non-reducing condition;
M: Marker
R: reducing condition;
M: Marker
Human CD137L/mFC; Human CD137/ His;
Recombinant Human CD137/His is captured on
Protein A chip, can bind to Human CD137L/mFc.
Log Human CD137, His tag EC50=4ng/ml
CD137 is immobilized at 2μg/mL (100 μL/well), it can bind to Utomilumab. The
concentration for 50% of maximal effect(EC50) of is 4 ng/ml.
Log Human CD137, His tag EC50=20ng/ml
CD137 is immobilized at 2μg/mL (100
μL/well), it can bind to Human CD137L. The concentration for 50% of maximal
effect(EC50) of is 20 ng/ml.
使用哺乳動物宿主系統是產生最生理原生的重組蛋白的理想選擇,如果需要的話,可以進行正確的磷酸化或適當折疊,以便在人類中用于治療使用。
根據客戶的需求,百英生物提供CHO-K1和HEK293細胞,使用哺乳動物細胞系統進行表達。 一般情況下,如果客戶需要更高純度的蛋白,我們會建議使用HEK293細胞制備融合蛋白。如果客戶需要高產量的抗體,我們比較推薦使用CHO-K1細胞。