親和力成熟是指得到的抗體親和力不能滿足抗體后期開發的要求，從而通過體外實驗提高抗體親和力的過程。常規的親和力成熟方法通過構建飽和突變庫，用噬菌體展示、酵母展示、核糖體展示等技術進行篩選。
百英生物抗體親和力成熟平臺是基于飽和突變技術FCMES-AM?（Full Coverage Mammalian Expression System For Affinity Maturation），但與構建飽和突變庫的方法不同，主要技術結合了高通量哺乳細胞表達系統，采用在CDR區每個氨基酸（除了半胱氨酸和甲硫氨酸）上進行單點飽和突變，從而獲得足夠的突變多樣性，同時又不會破壞抗體的蛋白質結構。該途徑實現了對體內抗體親和力成熟過程的最近似的模擬，很好的解決了飽和突變庫的偏向性問題。改造后的抗體通過SPR或FACS進一步親和力驗證。
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我們的抗體優化服務還包括:
| 服務步驟 | 服務詳情 | 服務周期 | 交付物 |
|---|---|---|---|
| 階段Ⅰ：親和力成熟序列設計 |
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3-4天 | 親和力成熟定點突變的設計報告 |
| 階段Ⅱ：哺乳系統高通量表達 |
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4周 |
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| 階段Ⅲ：突變熱點組合 |
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1-2周 |
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1周 |
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The parental antibody is VHH, after affinity maturation, off of the VHH improves and the affinity increases 23-fold, 19-fold and 6-fold separately.
Koff of the VHH improves and the affinity increases 6-fold, 23-fold and 19-fold separately.
The parental antibody is mouse IgG, after affinity maturation, the affinity increases 120-fold, 48-fold and 46-fold separately.
Affinity increases 120-fold, 48-fold and 46-fold separately.
通過點突變、鏈替換等技術對抗體進行親和力成熟，提高抗體活性，以便更好的用于下游實驗。抗體親和力的高低，都將影響抗體對目標抗原的親和力，所以進行親和力優化是十分必要的。除親和力優化之外，還會對抗體免疫原性、半衰期等方面的改造，以此改善抗體的特異性和效力，減少用藥劑量，降低毒副作用等。 1
在體內
機體在接受抗原刺激后，體細胞發生高頻突變，突變產生的各種親和力不同的B細胞克隆，經過濾泡樹突細胞捕獲，使得后代B細胞及其產生的抗體對抗原的平均親和力得到了提升，從而實現了親和力的體內成熟。 2
在體外
體外抗體親和力成熟屬于體外功能蛋白質分子進化的范疇，是模擬體內抗體親和力成熟的方式。體外抗體親和力成熟主要是在抗體 CDR區基因中引入突變采用各種突變策略模擬體內的高頻突變，基于大容量抗體庫的構建和篩選技術得到高親和力的基因工程抗體。最簡單的方法是通過隨機突變，也稱為點突變，模擬體內的體細胞超突變。
在體內初次反應產生抗體的親和力較低，在隨后的抗原刺激下，抗體可變區基因發生體細胞突變，造成親和力的改變，親和力提高的變種具有選擇優勢，最后形成產生高親和力抗體的B克隆細胞。3
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