全人源抗體,即完全由人類基因編碼的抗體,在篩選高親和力和特異性抗體的同時,大大降低了免疫源性,提高了抗體藥物的安全性和耐受性。全人源抗體的開發過程中,人源化小鼠扮演了至關重要的角色。相對于傳統的鼠源或嵌合抗體,人源化小鼠能夠直接獲得全人源抗體,無需進行改造,簡化了研發流程,降低了成本。
百英生物與賽業生物合作,將百英生物的AbDrop?(Droplet Based Antibody Discovery Platform)基于微液滴的單B細胞抗體開發平臺與賽業生物的HUGO-Ab?(HUmanized Genomic Ortholog for Antibody development)全人源化抗體小鼠模型結合,搭建了全新的全人源抗體發現平臺,進一步提升抗體發現效率和準確性。
我們的抗體發現服務還包括:
在篩選技術方面,百英生物的AbDrop?平臺利用微流控技術生成包裹單個漿細胞的液滴。
篩選100-200萬個漿細胞
完成單B細胞的NGS測序
基于微液滴的單B抗體開發平臺
上百條天然配對的重輕鏈序列
從免疫小鼠到活性驗證的抗體
HUGO-Ab?全人源化抗體小鼠能夠在體內產生具有高親和力和低免疫原性的全人源抗體,其卓越的性能在抗體發現過程中展現出良好的效果,得到多家跨國藥企、生物制藥公司和學術機構的認可,為治療性抗體新藥提供了高效的研發引擎。
擁有HUGO-Mab?小鼠、HUGO-Light?小鼠和HUGO-Nano?小鼠
抗體重鏈、Kappa和Lambda輕鏈可變區基因為人源基因
自研可實現Mb級敲入及敲除的TurboKnockout?技術,無專利糾紛困擾,是新藥研發項目的優選基因編輯技術
全人源化抗體小鼠
包含全部的人源抗體重鏈、Kappa和Lambda輕鏈可變區germline基因
授權使用或共同開發
抗體親和力達到nM-pM級
HUGO-Ab?全人源化抗體小鼠經過抗原免疫后,分別檢測了不同小鼠的2、3、4免后的血清效價,其血清效價均達到了1024K以上,我們選取了其中效價更優的427進行全人源抗體篩選。
CD138 beads富集后2×106個細胞/mL全部上機,培養2小時,導出陽性液滴數為7921個。
| Number of Detected Picodroplets | 1599226 |
|---|---|
| Number of Detected Picodroplets | 7921/1599226(0.5%) |
將篩選得到的細胞做單細胞測序,捕獲1809個細胞,其中具有V(D)J序列特征的1466個,比例達到81.62%。
| Reads Mapped to Any V(D)J Gene | 81.62% |
|---|---|
| Reads Mapped to lGH | 30.75% |
| Reads Mapped to lGK | 49.62% |
| Reads Mapped to lGL | 1.15% |
anti-PDL1候選分子體外分析。
人類單克隆抗體(mAb)可以通過兩種主要技術產生:噬菌體展示和轉基因小鼠。轉基因小鼠制備的全人源抗體,不僅大大減少了潛在的免疫原性,而且由于抗體是在體內產生,經歷了正常的裝配和成熟過程,從而保證抗體具有較高的靶親和力。
為了能夠加快抗體的發現周期,兼顧到篩選的通量,百英生物搭建了一個基于微流控技術的針對漿細胞的高通量快速篩選平臺。
微流控技術每秒可以生成千上萬的微液滴,細胞包裹于微液滴之中,可進行生長、裂解、代謝、反應等生物生化過程,并與液滴之中的熒光篩子進行充分結合,產生不同強度的熒光信號,之后利用微液滴分選技術將低產出和高產出的細胞通過熒光信號分選出來,實現分選過程的高通量化。
全人源的轉基因小鼠可直接用于人源化抗體篩選。從小鼠中分離出單個B細胞,利用單B細胞抗體篩選技術,可以在單個細胞水平上捕獲多樣性,從而發現獨特和高度特異性的抗體。與雜交瘤和展示技術相比,單B細胞技術能大大縮短抗體開發周期,減少試劑消耗,并保留抗體的天然VH和VL的配對。
基于國內創新性全人抗體藥物研發的需求,賽業生物憑借扎實的技術創新實力,基于TurboKnockout?技術,自主開發了HUGO-Ab?全人源化抗體小鼠,能夠在體內產生具有高親和力和低免疫原性的全人源化抗體,極大加快抗體發現和新藥研發過程,這一點已經得到了多家跨國藥企、生物制藥公司、科研學術機構的驗證。
基于ES打靶技術的TurboKnockout?技術采用了獨特的建系和基因改造技術,建立了具有高效遺傳優勢的TurboKnockout?ES細胞系,通過特定胚胎發育階段的顯微注射,使TurboKnockout?ES細胞100%代替內源ES細胞,從而實現跨越“嵌合體”階段,把ES打靶構建周期縮短至快至4個月。